Banca de DEFESA: ÉSSIA DE ALMEIDA LIMA

Uma banca de DEFESA de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE: ÉSSIA DE ALMEIDA LIMA
DATA: 30/08/2023
HORA: 08:00
LOCAL: Plataforma Google Meet
TÍTULO: Avaliação dos mecanismos de ação envolvidos no efeito anti-inflamatório da LQB 118
PALAVRAS-CHAVES: LQB 118. Macrófagos. Fagocitose.
PÁGINAS: 88
GRANDE ÁREA: Ciências Biológicas
ÁREA: Fisiologia
RESUMO: A LQB 118 é uma molécula híbrida sintética pertencente ao grupo das pterocarpanoquinonas, tendo sua estrutura baseada em dois grupos de moléculas naturais bioativas, as naftoquinonas e os pterocarpanos. Além das várias atividades biológicas relatadas, o nosso grupo vem demonstrando o papel imunomodulador da LQB 118, pela descrição e caracterização de seu efeito anti-inflamatório. No entanto, os mecanismos envolvidos no efeito da LQB 118 como moduladora da inflamação ainda não estão totalmente definidos. Dessa forma, o objetivo desse trabalho foi avaliar os mecanismos envolvidos na atividade anti-inflamatória da LQB 118 in vitro e in vivo. Inicialmente, para os experimentos in vitro, camundongos Swiss receberam uma injeção intraperitoneal (i.p.) de tioglicolato (4%). Após quatro dias, os macrófagos peritoneais foram obtidos e cultivados na concentração de 2x105, 5x105 ou 1,5x106 cels/poço. As células foram tratadas com a LQB 118 (5 μM, 1 μM, 0.5 μM e 0.1 μM) na presença ou ausência do estímulo inflamatório, zimosan (0,2 mg/mL), por 40 m in ou 24 h. Em seguida, os sobrenadantes foram recolhidos para a quantificação das citocinas IL- 10 e IL-12 por ELISA e do NO pelo reagente de Griess. Além disso, a atividade fagocítica às partículas de zimosan também foi quantificada. Por fim, para analisar o mecanismo de ação da molécula, as células foram incubadas com os anticorpos anti- iNOS, anti-NFkB e anti-p-NFkB e com partículas de zimosan fluorescentes e analisadas por citometria de fluxo. O zimosan induziu aumento das citocinas e do óxido nítrico e o tratamento com a LQB 118 foi capaz de reduzir os níveis de IL-12 e do NO, sem interferir nos níveis de IL-10. Além disso, a LQB 118 modulou negativamente a expressão do NFkB total e fosforilado, além de reduzir a capacidade fagocítica dos macrofagos peritoneais. Adicionalmente, foi avaliado o efeito da LQB 118 in vivo, em modelo de peritonite induzida por zimosan. Para isso, camundongos Swiss foram tratados via i.p. com a LQB 118 nas doses de 10 e 20 mg/kg. 1 h após o tratamento, foram estimulados com zimosan (2 mg/mL) de modo a induzir uma inflamação no peritônio. Após 4 h o lavado peritoneal foi coletado e utilizado para contagem total e diferencial de células por microscopia óptica, para a quantificação das citocinas TNF-α, IL-1β, IL-6 e IL-10 por ELISA e para análise da expressão da MAP quinase p38 por citometria de fluxo. O zimosan, como esperado, induziu aumento da migração de células, dos níveis das citocinas e da fosforilação da p38. O tratamento com a LQB 118, por sua vez, foi capaz de reduzir o número total de células na cavidade peritoneal, pela redução na migração das células polimorfonucleares. Além disso, essa molécula foi capaz de reduzir os níveis das citocinas IL-1β, TNF-α e IL-10 e de modular negativamente a fosforilação da p38 induzida por zimosan. Dessa forma, esses dados demonstram os mecanismos envolvidos na atividade anti-inflamatória da LQB 118 e contribuem para o entendimento das potencialidades dessa substância em atuar em processos fisiológicos.
MEMBROS DA BANCA:
Externo à Instituição - LEANDRO AUGUSTO DE OLIVEIRA BARBOSA
Externo à Instituição - MARCIA REGINA PIUVEZAM
Presidente - 1340309 - SANDRA RODRIGUES MASCARENHAS
Interno - 1889422 - TATJANA KEESEN DE SOUZA LIMA CLEMENTE