Banca de DEFESA: CRISTINE AGRINE PEREIRA DOS SANTOS RODRIGUES

Uma banca de DEFESA de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE: CRISTINE AGRINE PEREIRA DOS SANTOS RODRIGUES
DATA: 04/07/2022
HORA: 08:30
LOCAL: Google Meet
TÍTULO: INDUÇÃO IN VITRO DE EMBRIOES GINOGENICOS DE CEBOLA (Allium cepa L.) A PARTIR DE OVARIOS NÃO FECUNDADOS
PALAVRAS-CHAVES: Allium, haploide, melhoramento genetico
PÁGINAS: 99
GRANDE ÁREA: Ciências Agrárias
ÁREA: Agronomia
SUBÁREA: Fitotecnia
ESPECIALIDADE: Melhoramento Vegetal
RESUMO: O melhoramento de plantas é um processo longo, que dura em média de 12 a 15 anos. Reduzir o tempo necessário para produção de uma nova variedade significa diminuição nos custos e antecipação dos lucros. Atualmente a obtenção de plantas haploides e duplo haploide tem sido o objetivo das empresas agrícolas e também para programas de melhoramento genético. O cruzamento entre duas linhagens puras permite obter híbridos homozigotos para todos os seus caracteres. Este tipo de organismo apresenta algumas características agronômicas de grande valor, como por exemplo vigor híbrido, maior resistência a diferentes estresses bióticos e abióticos e homogeneidade nas culturas. Um haplóide possui apenas um conjunto de cromossomos. Os gametas pólen e óvulo, são células haploides. A planta obtida pela duplicação de cromossomos de um haplóide é chamada de duplo haplóide.As plantas haplóides são menores e menos vigorosos do que as diplóides e apresentam alto grau de esterilidade. A utilização dessa técnica em programas de melhoramento não é uma prática rotineira porque não existem métodos eficientes para regenerar haplóides na maioria das espécies. Os principais métodos para obtenção de plantas haplóides são: a cultura de anteras, óvulos, ovários, a cultura de micrósporos e o Método Bulbosum (que envolve cruzamento interespecífico e resgate de embriões). Para realização da técnica há necessidade de haver protocolos de obtenção de haplóides. Os componentes da meio de cultivo é um dos principais fatores para a indução de haploides in vitro assim como a concentração de carboidratos para o desenvolvimento e crescimento das plantas. Os reguladores, desempenham um papel importante na reprogramação de células haploides do gametófito para o via esporofítica por isso a importância de dosar as quantidade necessárias para a obtenção de respostas eficientes, outro fator importante é genótipo e a espécie a ser induzdida pois não exiete um protocolo universal para ginogênese in vitro. Portanto o objetivo deste trabalho foi otimizar um protocolo através da cultura in vitro de botões florais de Allium cepa L. Afim de induzir embriões ginogenicos. Os experimentos foram desenvolvidos na UFPB/CCA no laboratório de biotecnologia vegetal. Utilizou-se botões não-fertilizados da variedade IPA-111 e BRS Alta Franciscana que foram inoculados em meio de cultura BDS, MS e B5, sendo inoculados 20 botões florais não-fertilizados em placa de Petri por 120 dias. O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado, em esquema fatorial 32, os tratamentos consistiram na combinação de doses 0, 1.0 e 2.0 mg.L-1 de 2,4-D e 0, 1.0 e 2.0 mg.L-1 de BAP, com 7 repetições cada. As variáveis analisadas foram quanto a Indução de bulbo formados, número de embriões formados ,número de calos formados , diâmetro do calo, número de folhas,comprimento da folha principal ,comprimento da raiz principal , número de calo formado por variedade , número de embriões formados por variedade , número de plântulas albinas formada por variedade , porcentagem de calo por variedade, porcentagem de embriões por variedade,porcentagem de plantas albinas por variedade , porcentagem de calo formado por tratamento e porcentagem de embriões formados por tratamento.O segundo experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado, em esquema fatorial 22, os tratamentos consistiram em duas variedades de cebola IPA 11 e BRS alta franciscana, cultivadas em dois protocolos: (A) descrito por Michalik. Onde botões florais foram inoculados em meio BDS suplementado com 2,0 mg.L-1 de 2,4 D e 2,0 mg.L-1 de BAP e 100 gL-1 de sacarose onde ficaram por 15 dias. Após esse período fez -se o subcultivo em meio de regeneração (BDS) suplementado com 1,0 mg.L-1 de ANA e 2,0 mg.L-1de KIN e 100gL-1 de sacarose. Após 30 dias o embrião foi subcultivado em meio MS sem reguladores de crescimento e suplementado com 30 g.L-1 de sacarose até o desenvolvimento da plântula. Protocolo (B) descrito por Adhiyamaan, botões florais foram inoculados em meio BDS suplementado com 100g de sacarose e 2mM de putrescina filtroesterelizado, onde ficaram por 15 dias, em seguida, foram subcultivado em meio de regeneração (BDS) suplementado com 0,01mM de spermidina, por um período de 30 dias, onde os embriões foram transferidos para meio MS, sumplementado com 40g de sacarose e livre de reguladores de crescimento até o desenvolvimento da plântula. As variaveis analisadas foram: número de calo, número de embrião formado, botões vitrificados, botões viáveis, placas contaminadas, porcentagem de calo formado,número de plantas. Para o terceiro experimento tambem inoculou-se 20 botões florais, que foram colocados em placas de petri contendo os meio de indução B5, BDS e MS, suplementados com 2,0 mg.L-1 de 2,4 D e 2,0 mg.L-1 de BAP, todos os meios tiveram o pH ajustado para 5,8 antes da adição de 7 g.L-1 de ágar, em seguida, autoclavado por 15 minutos a 121°C. As placas inoculadas foram levada para a sala de crescimento com iluminação de (16/8h) a 25°C por um período de 120 dias até a produção do embrião e calos e também foram realizadas caracterizações, onde avaliou-se formação de brotos, número de embriões, número de calos, calos friáveis, calos oxidados botões viáveis e botões vitrificados. Os dados foram submetidos a análise de variância e quando houve diferenças significativas, as médias foram comparadas pelo teste Scott Knott ao nível de 5% de probabilidade. Observou-se que os tratamentos mais responsivos tem em sua composição 2,0 mg.L-1 de 2,4-D + 2,0 mg.L-1 de BAP. O meio de cultura BDS quando suplementado com poliaminas promoveu maior eficiência na indução de embrioes ginogenicos para as variedade IPA 11, assim como tambem evidenciou maior numero de calos, menor oxidação dos explantes. Quanto aos tres meios testados para a indução o meio BDS proporcionou um maior percentual de embriões e menor taxa de formação e oxidação dos calos enquanto os meio MS e B5 apresentaram maior taxa de calos oxidados e menor número de embriões. Portanto pode-se concluir que O meio BDS suplementado doses de 2mgL-1 de 2,4 D e 2,0mgL-1 e BAP induzem de forma sastifatoria a indução de embriões para as duas variedades, e ao utilizar Putrescina e Spermidina essas frequências aumtam para a variedade BRS alta franciscana. Quanto ao meio de cultura o Meio que melhor desempenha o desenvolvimento na indução é o meio BDS
MEMBROS DA BANCA:
Presidente - 388164 - MAILSON MONTEIRO DO REGO
Interno - 337908 - RISELANE DE LUCENA ALCANTARA BRUNO
Externo à Instituição - ANGELA MARIA DOS SANTOS PESSOA
Externo à Instituição - PRISCILA ALVES BARROSO