Banca de DEFESA: YASMIM VIEIRA SILVA

Uma banca de DEFESA de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE: YASMIM VIEIRA SILVA
DATA: 26/04/2024
HORA: 10:00
LOCAL: Auditório do departamento de Biologia Molecular
TÍTULO: EXPRESSÃO DO CANAL KV10.1 EM PACIENTES COM CÂNCER COLORRETAL: IMPLICAÇÕES DIAGNÓSTICAS E TERAPÊUTICAS
PALAVRAS-CHAVES: Câncer colorretal; citotoxicidade; docking molecular; Eag1; PCR em tempo real;
PÁGINAS: 92
GRANDE ÁREA: Ciências Biológicas
ÁREA: Genética
SUBÁREA: Genética Humana e Médica
RESUMO: O câncer colorretal é um dos tipos mais comuns de câncer globalmente, com 45.630 novos casos e 20.245 mortes no Brasil em 2023, atribuídos a fatores como exposição a agentes cancerígenos e envelhecimento populacional. Apesar de sua alta incidência, pode ser tratado eficazmente se detectado precocemente, embora os métodos de diagnóstico atuais tenham limitações. Os canais de potássio dependentes de voltagem (Kv) desempenham um papel crucial na regulação do ciclo celular e na progressão tumoral. O Kv10.1, por sua vez, é um canal de potássio restrito a alguns tipos de tecido em condições saudáveis, como o neuronal, mas foi documentado a presença deste canal em tecidos periféricos em pacientes diagnosticados com câncer colorretal, câncer de mama, cervical e outros. Dessa forma, o objetivo deste trabalho foi avaliar o perfil de expressão do gene para o Kv10.1 pela técnica de PCR em tempo real, em amostras tumorais e saudáveis de pacientes com câncer colorretal, e em linhagens celulares, correlacionando estes resultados aos dados clínico-patológicos, além de avaliar por estratégias de bioinformática e viabilidade celular in vitro a susceptibilidade do canal como alvo para tratamento. Foram obtidas 27 amostras frescas de tecido tumoral e saudável de pacientes diagnosticados com CCR (> 18 anos) no Hospital Napoleão Laureano (HNL). O projeto foi aprovado no CEP sob CAAE: 5.017.299. As linhagens tumorais utilizadas foram HT-29, LoVo, HCT-116, K562 e HEK-293. A análise da expressão gênica (RNAm) do Kv10.1 foi realizada pela técnica da PCR em tempo real, usando o gene normalizador GAPDH e o corante SYBR Green. Nossos dados demonstraram que houve maior expressão do Kv10.1 nas amostras tumorais, quando comparado ao tecido saudável adjacente do mesmo paciente (p=0.0282) pelo Teste de Mann-Whitney. A expressão do gene do Kv10.1 mostrou estar correlacionada com a idade, sendo mais expresso em pacientes abaixo dos 60 anos (p=0.0112), com a localização, sendo mais expresso em tumores localizados no lado esquerdo (p=0.0173), com o tamanho do tumor, sendo mais expresso em tumores menores que 5cm (p=0.0343), e o com o estágio inicial (I/II) (p=0.0078). O canal Kv10.1 foi submetido ao estudo de docking molecular, utilizando os compostos A398 e 5-Fluororacil, como ligantes. Os compostos demonstraram valores de energia de ligação negativos, para o A398 (-9,59 Kcal/mol), demonstrando melhor interação com o Kv10.1, quando comparado ao 5-FU (-4,05 Kcal/mol), fármaco utilizado na clínica para o tratamento do CCR. No ensaio de MTT, o composto A398 inibiu significativamente a viabilidade de células HCT-116, com CI50 de 18,24µM em 24h e 9,87µM em 72h. Já o 5-FU mostrou inibição significativa somente após 72h, com CI50 de 14,85µM, evidenciando a dependência de tempo e concentração para sua eficácia. Diante disso, o Kv10.1 demonstrou ser útil como biomarcador para o CCR, e bom alvo farmacológico, considerando que se encontra diferencialmente expresso nesse tipo de tumor, e apresenta potencial para ser utilizado como estratégia de tratamento para este câncer.
MEMBROS DA BANCA:
Interno - 2277768 - DAVI FELIPE FARIAS
Externo ao Programa - 1121078 - DEMETRIUS ANTONIO MACHADO DE ARAUJO
Presidente - 3475890 - GLAUCIA VERISSIMO FAHEINA MARTINS