Banca de DEFESA: VALGRICIA MATIAS DE SOUSA

Uma banca de DEFESA de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE: VALGRICIA MATIAS DE SOUSA
DATA: 29/01/2025
HORA: 09:00
LOCAL: Link da vídeoconferência: https://meet.google.com/gei-hnhs-pks
TÍTULO: Mecanismos de ação anticâncer colorretal in vitro e avaliação da toxicidade não clínica em modelo de peixe-zebra do derivado acridínico (E)-1’-((4-bromo-benzilideno)amino)5’-oxo-1’5’-dihidro-10H-espiro[acridina-9,2’-pirrol]-4’-carbonitrila (AMTAC-19).
PALAVRAS-CHAVES: Composto espiro-acridínico; Carcinoma colorretal humano; Atividade antitumoral; Estresse oxidativo; Docking molecular; Toxicidade
PÁGINAS: 185
GRANDE ÁREA: Ciências da Saúde
ÁREA: Farmácia
RESUMO: O câncer colorretal (CCR) é um importante problema de saúde pública mundial. Diante da necessidade de desenvolvimento de agentes mais efetivos e/ou com menor toxicidade, o derivado acridínico (E)-1’-((4-bromo-benzilideno)amino)5’-oxo-1’5’-dihidro-10H-espiro[acridina-9,2’-pirrol]-4’-carbonitrila (AMTAC-19) foi previamente sintetizado e testado quanto ao seu potencial antitumoral in vitro. AMTAC-19 apresentou significativa citotoxicidade em linhagem de células de câncer colorretal humano HCT-116 (concentração inibitória média – CI50 = 10,35 ± 1,66 µM). Diante disso, o presente trabalho objetivou caracterizar os mecanismos de ação anti-CCR do AMTAC-19 por meio de ensaios in silico e in vitro, e a sua embriotoxicidade em modelo de peixe-zebra. Os resultados do docking molecular evidenciaram interações favoráveis entre o AMTAC-19 e as estruturas cristalográficas da Proteína Cinase Regulada por Sinal Extracelular 1 (ERK1), da Proteína Cinase N-terminal c-Jun 1 (JNK1), da Proteína Cinase Ativada por Mitógeno p38α (p38α MAPK), da Proteína Cinase B (PKB/AKT), do Fator Nuclear kappa B (NF-κB; p50/p65) e da Linfoma de Células B-2 (BCL-2). Nos ensaios in vitro, a marcação com anticorpos específicos permitiu observar que, após 48 h de tratamento com o AMTAC-19, houve aumento significativo do percentual de células marcadas com anticorpos anti-p-ERK1/2 e anti-p-JNK1/2, e redução significativa do percentual de células marcadas com anticorpos anti-p-BCL-2. O pré-tratamento com inibidores de ERK1/2 ou JNK preveniu significativamente a citotoxicidade do AMTAC-19 em células HCT-116. Na análise do estado redox, o AMTAC-19 estimulou a produção de Espécies Reativas de Oxigênio (ROS) após 30 min e 1 h de tratamento, e o pré-tratamento com N-acetil-L-cisteína (NAC) preveniu significativamente a sua citotoxicidade. O uso do cloreto de 5,5′,6,6′-tetracloro-1,1′,3,3′-tetraetilbenzimidazolilcarbocianina (JC-1) permitiu observar que o AMTAC-19 induz alteração no potencial de membrana mitocondrial (Δψm) de células HCT-116. O uso do corante Hoechst 34580, utilizado para analisar características morfológicas de apoptose por microscopia confocal a laser, demonstrou que o AMTAC-19 induziu aumento significativo do número de células fluorescentes após tratamento de 48 h, sendo observada condensação da cromatina, que corrobora o efeito pró-apoptótico induzido por esta molécula. Adicionalmente, o ensaio clonogênico foi utilizado para avaliar as alterações na sobrevivência e proliferação celular induzidas pelo AMTAC-19, mostrando que o composto teste, na concentração de 1,56 µM (correspondente a 1/8 da CI50), induziu redução significativa na capacidade de formação de colônias de células HCT-116. Por fim, a avaliação da toxicidade não clínica em modelo de peixe-zebra, evidenciou que o tratamento de embriões e larvas com AMTAC-19 (100 μM – correspondente a aproximadamente 10 vezes a CI50 em células HCT-116) por 96 h de exposição, não causou morte dos animais, estimando que a Concentração Letal Média (CL50) do composto foi maior que 100 μM. Em resumo, o AMTAC-19 apresenta efeito anti-CCR in vitro por indução de apoptose, estresse oxidativo e modulação das proteínas ERK1/2, JNK e BCL-2.
MEMBROS DA BANCA:
Externo ao Programa - 1636189 - CLAUDIO ROBERTO BEZERRA DOS SANTOS
Interno - 1335891 - FELIPE QUEIROGA SARMENTO GUERRA
Presidente - 1632241 - MARIANNA VIEIRA SOBRAL
Interno - 1524402 - RICARDO DIAS DE CASTRO
Externo à Instituição - TERESINHA GONCALVES DA SILVA