Banca de DEFESA: LAIZ ALINE SILVA BRASILEIRO

Uma banca de DEFESA de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE: LAIZ ALINE SILVA BRASILEIRO
DATA: 27/08/2018
HORA: 14:00
LOCAL: Auditório do IPeFarM
TÍTULO: A 7-metoxiflavona apresenta efeito tocolítico por modulação negativa da via Rho cinase e da calmodulina em ratas
PALAVRAS-CHAVES: 7-metoxiflavona, tocolítico, útero de rata, RhoA/Rho cinase, calmodulina
PÁGINAS: 127
GRANDE ÁREA: Ciências da Saúde
ÁREA: Farmácia
RESUMO: Uma vez que o flavonoide 7-metoxiflavona (7-MF), um dos componentes majoritarios isolados de Zornia brasiliensis Vogel, apresentou efeito tocolitico in vitro em ratas, resolveu-se caracterizar esse mecanismo de acao. O utero de rata era montado em cubas de banhos para orgao isolado onde as contracoes isotonicas e isometricas eram monitoradas (n = 5). Observou-se que a 7-MF relaxou o utero de rata pre-contraido tanto por ocitocina (OCI) (CE50 = 3,5 ± 0,3 x 10-5 M) como por KCl (CE50 = 2,2 ± 0,2 x 10-5 M) sendo cerca de 2 vezes mais potente frente a este ultimo agente contratil, sugerindo a participacao dos canais de calcio dependentes de voltagem (CaV) no efeito tocolitico da 7-MF. Para confirmar essa hipotese, foram realizadas curvas cumulativas ao CaCl2 na ausencia e na presenca da 7-MF e observou-se um deslocamento da curva controle para direita com reducao do seu efeito maximo apenas na concentracao de 3 x 10-5 M (30%), indicando que provavelmente o bloqueio do influxo de Ca2+ atraves dos CaV nao seja o principal mecanismo tocolitico do flavonoide. Resolveu-se avaliar uma possivel participacao dos canais de potassio no efeito tocolitico da 7-MF, utilizando o cloreto de cesio, um bloqueador nao seletivo de canais de K+, e na sua presenca a curva controle de relaxamento da 7-MF nao foi alterada (CE50 = 3,3 ± 0,6 x 10-5 M), descartando uma modulacao positiva dos canais de K+ no efeito tocolitico da 7-MF. Uma vez que as prostaglandinas estao envolvidas em processos fisiopatologicos uterinos e sendo os inibidores de ciclo-oxigenases (COXs) uma das principais classes utilizadas para o tratamento da dismenorreia, resolveu-se avaliar o possivel envolvimento da via da COX no mecanismo de acao tocolitica da 7-MF e observou-se que na presenca da indometacina, um inibidor nao seletivo das COXs, a curva controle nao foi deslocada (CE50 = 4,8 ± 0,6 x 10-5 M), indicando que a inibicao destas enzimas nao esta envolvida na acao tocolitica da 7-MF. Outra via de relaxamento muscular liso e a dos receptores adrenergicos-β. Para avaliar uma possivel ativacao destes receptores na acao da 7-MF, utilizou-se o (S)-(-)-propranolol, um antagonista dos receptores adrenergicos-β, e observou-se que nao houve alteracao da potencia relaxante na presenca do bloqueador (CE50 = 2,2 ± 0,5 x 10-5 M), indicando que a 7-MF nao age por modulacao positiva desses receptores para induzir o efeito tocolitico. Como uma das principais vias de relaxamento do musculo liso e a via do oxido nitrico (NO), avaliou-se a participacao dessa via no efeito tocolitico da 7-MF e observou-se que na presenca de L-NAME, um inibidor nao seletivo de sintase do NO (NOS), nao houve alteracao da potencia relaxante (CE50 = 4,4 ± 1,2 x 10-5 M), descartando tambem essa via no efeito tocolitico da 7-MF. Um passo downstream em comum das vias Gs e do NO e a acao da enzima fosfodiesterase (PDE). Na presenca da aminofilina, um bloqueador nao seletivo de PDE, observou-se que nao houve alteracao da potencia relaxante da 7-MF (CE50 = 2,8 ± 0,5 x 10-5 M), indicando que provavelmente nao e por ativacao desta que o flavonoide exerce seu mecanismo de acao tocolitica. A inibicao de vias contrateis tambem pode ocasionar relaxamento muscular liso, desta forma avaliou-se a participacao da via RhoA/Rho cinase (ROCK) no efeito tocolitico da 7-MF. Na presenca de Y-27632, um bloqueador nao seletivo de ROCK a curva foi deslocada para a esquerda, com aumento da potencia relaxante em torno de 22 vezes (CE50 = 1,6 ± 0,7 x 10-6 M), sugerindo que 7-MF modula negativamente a via ROCK para exercer seu efeito tocolitico. Ainda no mecanismo contratil, da-se um destaque para a calmodulina, um dos principais mediadores para a sinalizacao do Ca2+. Para avaliar a sua participacao no efeito tocolitico da 7-MF, utilizou-se o calmidazolium, um bloqueador da calmodulina e observou-se uma potencializacao do efeito relaxante da 7-MF (CE50 = 6,5 ± 1,6 x 10-7 M), em torno de 54 vezes, confirmando a modulacao negativa da calmodulina no seu efeito tocolitico. Dessa forma, o mecanismo de acao tocolitica proposto para a 7-MF em ratas e a inibicao da via ROCK e da calmodulina.
MEMBROS DA BANCA:
Externo à Instituição - CIBERIO LANDIM MACEDO
Presidente - 2337274 - FABIANA DE ANDRADE CAVALCANTE OLIVEIRA
Interno - 6336328 - REINALDO NOBREGA DE ALMEIDA