Banca de DEFESA: GISLAINE ALVES DE OLIVEIRA

Uma banca de DEFESA de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE: GISLAINE ALVES DE OLIVEIRA
DATA: 18/02/2013
HORA: 14:00
LOCAL: PPgPNSB
TÍTULO: A ação espasmolítica do óleo essencial de Lippia microphylla Cham. e de seus constituintes majoritários envolve o bloqueio do influxo de cálcio em íleo de cobaia
PALAVRAS-CHAVES: Lippia microphylla, timol, carvacrol, ação espasmolítica, cálcio.
PÁGINAS: 114
GRANDE ÁREA: Ciências da Saúde
ÁREA: Farmácia
RESUMO:

Das partes aéreas da espécie Lippia microphylla Cham. (Verbenaceae) foi extraído o óleo essencial (LM‑OE), tendo como componentes majoritários o timol e o carvacrol. O objetivo deste trabalho foi investigar e caracterizar o efeito espasmolítico do óleo LM-OE em íleo de cobaia, bem como verificar se este efeito era devido aos seus constituintes majoritários. Foram realizadas medidas de contrações isotônicas e isométricas e do cálcio citosólico. O óleo LM‑OE inibiu as contrações fásicas induzidas por 10^‑6 M de histamina ou de carbacol (CCh) (CI₅₀ = 15,8 ± 2,3 e 24,4 ± 2,9 µg/mL, respectivamente). Da mesma forma, o timol, o carvacrol e o complexo timol‑carvacrol antagonizaram as contrações fásicas induzidas por histamina (CI₅₀ = 14,2 ± 1,6; 13,6 ± 1,3 e 13,0 ± 2,1 µg/mL, respectivamente) ou por CCh (CI₅₀ = 21,3 ± 3,8; 16,0 ± 2,6 e 27,9 ± 4,8 µg/mL, respectivamente). Quando comparado com o óleo, não houve diferença em nenhum dos casos. Do mesmo modo, o óleo LM‑OE relaxou, de maneira equipotente, o órgão pré-contraído com 40 mM de KCl, com 10^-5 M de CCh ou com 10^‑6 M de histamina (CE₅₀ = 7,6 ± 0,8; 7,2 ± 1,3 e 6,8 ± 0,6 µg/mL, respectivamente). Como o passo comum na via de sinalização destes agentes contráteis são os canais de cálcio dependentes de voltagem (Ca_V), hipotetizou-se que de alguma forma o óleo estaria impedindo o influxo de Ca²⁺ através destes canais. Visto que provavelmente os componentes majoritários são os marcadores biológicos para esta espécie, avaliou-se o efeito dos mesmos sobre a contração tônica induzida por 40 mM de KCl. Observou-se que o timol, o carvacrol e o complexo timol-carvacrol relaxaram o órgão de maneira significante e dependente de concentração (CE₅₀ = 5,2 ± 1,1; 12,6 ± 0,8 e 5,1 ± 2,0 µg/mL, respectivamente), sendo o carvacrol o menos potente entre os três, os quais se mostraram equipotentes ao óleo LM‑OE. Para confirmar a hipótese da participação dos Ca_V no mecanismo espasmolítico do óleo LM‑OE, foram feitas curvas concentrações‑resposta cumulativas ao CaCl₂ em meio despolarizante nominalmente sem Ca²⁺ na ausência (controle) e na presença do óleo LM-OE, o qual antagonizou essas contrações, além de relaxar o órgão pré‑contraído com S‑(‑)-Bay K 8644 (CE₅₀ = 8,5 ± 1,5 µg/mL), agonista seletivo dos Ca_V1, confirmando assim que o subtipo de Ca_V envolvido é o Ca_V1. O fato do CsCl, um bloqueador não seletivo dos canais de K⁺, não ter alterado a potência relaxante do óleo LM‑OE no íleo pré‑contraído com 10^-5 M de CCh, descarta a hipótese da modulação positiva desses canais, o que levaria a um bloqueio indireto dos Ca_V. Em experimentos utilizando a camada circular do íleo de cobaia, o óleo antagonizou as contrações fásicas induzidas por 10^-6 M de CCh (CI₅₀ = 30,1 ± 1,5 µg/mL), o que sugere uma possível inibição da sinalização intracelular de Ca²⁺ para exercer seu efeito espasmolítico. A viabilidade das células musculares lisas da camada longitudinal foi avaliada na ausência e na presença de 81 µg/mL do óleo LM‑OE, não havendo morte celular no período 2 h de contato das células com o óleo LM‑OE. Na presença do óleo LM‑OE, a intensidade de fluorescência em miócitos intestinais de cobaia estimulados por histamina foi reduzida em consequência da redução da [Ca²⁺]_c. Em conclusão, o óleo LM‑OE age por impedir o influxo de cálcio através dos Ca_V1, por possivelmente inibir a sinalização intracelular de Ca²⁺ e redução da concentração citosólica desse íon, para promover seu efeito espasmolítico em íleo isolado de cobaia.

MEMBROS DA BANCA:
Presidente - 337384 - BAGNOLIA ARAUJO COSTA
Interno - 2113418 - EDUARDO DE JESUS OLIVEIRA
Externo à Instituição - MARIA APARECIDA RIBEIRO VIEIRA - UFMG