Banca de DEFESA: JOAO CARLOS LIMA RODRIGUES PITA

Uma banca de DEFESA de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE: JOAO CARLOS LIMA RODRIGUES PITA
DATA: 26/02/2014
HORA: 14:00
LOCAL: PPgPNSB
TÍTULO: AVALIAÇÃO DA TOXICIDADE E FARMACOCINÉTICA DO TRACHYLOBANO-360, UM DITERPENO ISOLADO DE Xylopia langsdorffiana St. Hil. & Tul. (ANNONACEAE)
PALAVRAS-CHAVES: Xylopia langsdorffiana. Trachylobano-360. Farmacocinética. Toxicologia. CLAE-EMn.
PÁGINAS: 130
GRANDE ÁREA: Ciências da Saúde
ÁREA: Farmácia
RESUMO: A avaliação do perfil farmacocinético e toxicológico é essencial no estudo de novos candidatos a fármacos. No entanto, estes estudos são escassos e vêm sendo realizados, em muitos casos, após o início dos ensaios clínicos. Trachylobano-360 (T-360), o diterpeno ácido ent-7 a-acetoxitrachylobano-18-óico obtido de Xylopia langsdorffiana, apresenta poucos estudos farmacodinâmicos, porém suas atividades antitumoral e espasmolítica tornam-no uma molécula promissora. Além disso, não há relatos na literatura de estudos toxicológicos e farmacocinéticos deste produto natural. Considerando todos esses aspectos, o presente trabalho objetiva avaliar a toxicidade e a farmacocinética do T-360. No ensaio de toxicidade aguda em camundongos, o T-360 mostrou baixa toxicidade nas doses de 50 mg/kg (e.v.) e 300 mg/kg (i.p.), não apresentando nenhuma alteração comportamental e hematológica significantes. Porém, a dose de 300 mg/kg (e.v.) provocou morte em quatro de seis animais (DL50 estimada em 200 mg/kg). O T-360 não se mostrou genotóxico no ensaio do micronúcleo, pois não aumentou a frequência de eritrócitos micronucleados de camundongos tratados com 25, 150 e 300 mg/kg (i.p.). Dentre as técnicas bioanalíticas apropriadas para o estudo farmacocinético, destaca-se a cromatografia líquida de alta eficiência acoplada ao espectrômetro de massas (CLAE-EMn). Foi desenvolvido um método CLAE-EMn que consistiu em ionização por ESI, em modo negativo, basificando o meio, com detecção do íon molecular 359 m/z. O estudo de fragmentação mostrou que o íon 359 m/z é quebrado em 299 m/z, sendo esta fragmentação utilizada para detecção do T-360. As melhores condições cromatográficas estabelecidas foram: eluição isocrática em coluna C18, com fase móvel composta de H2O:MeCN (65:35) e 0,1% de NH4OH na fase aquosa. No desenvolvimento do método de extração do T-360 em sangue total avaliou-se as influências do tipo de solvente extrator e diferentes tempos e forças de centrifugação. A partir destas comparações, o T-360 foi melhor recuperado (37,02%) da matriz sangue utilizando CHCl3 e 14.000 x g por 15 min, apresentando efeito de matriz e eficiência do processo de extração de -51,23% e 18,05%, respectivamente. Após a otimização do método, repetindo-se o procedimento e acidificando a amostra, houve aumento da recuperação do T-360 (49,47%), diminuição do efeito de matriz (-37,60%) e aumento da eficiência do processo de extração (32,24%). Na validação do método analítico para quantificação do T-360 em sangue total, utilizando a Riparina I como padrão interno (PI), o método apresentou-se como seletivo/específico, linear no intervalo de concentrações avaliado, exato e preciso. Além disso, apresentou limite de detecção e quantificação de 50 e 100 ng/mL, respectivamente. Por último, parâmetros farmacocinéticos foram obtidos através da aplicação do método validado às amostras de sangue coletadas de camundongos submetidos ao tratamento com T-360 na dose de 25 mg/kg (e.v.), obtendo-se como resultados: Cmax de 321,34 µg/mL, t1/2 de 3,89 min, CLs de 830,97 mL/h/kg e Vd 0,08 L/kg, o que caracteriza distribuição tecidual. Os resultados sugerem então que o T-360 continua sendo uma molécula promissora por apresentar baixa toxicidade. Além disso, os resultados farmacocinéticos obtidos impulsionam a continuidade da investigação de outros parâmetros, usando outras vias de administração, e o estudo de metabólitos responsáveis, pelo menos em parte, pela atividade antitumoral.
MEMBROS DA BANCA:
Externo à Instituição - AURIGENA ANTUNES DE ARAUJO
Externo ao Programa - 2526001 - FABIO SANTOS DE SOUZA
Externo ao Programa - 2115773 - LIANA CLEBIA SOARES LIMA DE MORAIS
Presidente - 1632241 - MARIANNA VIEIRA SOBRAL CASTELLO BRANCO
Interno - 6336328 - REINALDO NOBREGA DE ALMEIDA