Banca de DEFESA: SARAH REBECA DANTAS FERREIRA

Uma banca de DEFESA de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE: SARAH REBECA DANTAS FERREIRA
DATA: 26/02/2018
HORA: 14:00
LOCAL: PgPNSB
TÍTULO: Atividade tocolítica in vitro do extrato etanólico e flavonoides isolados de Zornia brasiliensis Vogel (Leguminosae) em ratas.
PALAVRAS-CHAVES: espasmolítico, extrato etanólico, metoxiflavona, útero de rata.
PÁGINAS: 140
GRANDE ÁREA: Ciências da Saúde
ÁREA: Farmácia
RESUMO: Zornia brasilliensis Vogel, conhecida por “urinaria” ou “carrapicho”, e utilizada popularmente como diuretica, no tratamento de doencas venereas e desordens gastrintestinais. Em triagem realizada em nosso laboratorio, o extrato etanolico obtido das partes aereas de Zornia brasiliensis (ZB-EtOHPA) apresentou efeito espasmolitico em diversos musculos lisos (ileo e traqueia de cobaia, aorta e corpo cavernoso de rato e utero de rata. Diante disso, o objetivo deste trabalho foi caracterizar o mecanismo de acao tocolitica in vitro do ZB-EtOHPA em ratas, alem de avaliar e comparar um possivel efeito tocolitico de flavonoides isolados desta especie. As contracoes isotonicas e isometricas foram monitoradas (n = 5). Baseado no fato de que o ZB-EtOHPA apresentou previamente efeito tocolitico em utero de rata frente as contracoes fasicas, decidiu investigar seu efeito sobre as contracoes tonicas induzidas por KCl e por ocitocina (OCI). O extrato foi mais potente em relaxar o utero pre-contraido com OCI (CE50 = 5,5 ± 1,3 μg/mL do que com KCl (CE50 = 22,0 ± 1,3 μg/mL). Como o passo comum na via de sinalizacao destes agentes contrateis sao os canais de calcio dependentes de voltagem (Cav), propos-se que o extrato estaria inibindo esses canais. O ZB-EtOHPA deslocou para a direita as curvas cumulativas controle de CaCl2 com reducao do seu efeito maximo, alem de relaxar o ileo pre‑contraido com o S‑(‑)‑Bay K8644, um agonista dos CaV1 (CE50 = 84,3 ± 10,6 μg/mL), demonstrando que o extrato inibe o influxo de Ca2+ atraves dos CaV1. Tendo em vista que os CaV podem ser modulados negativamente pela via do oxido nitrico (NO), decidiu‑se avaliar a participacao dessa via em utero de rata pre-contraido com OCI. Para tanto, utilizou‑se L‑NAME, um inibidor nao seletivo de sintase do NO (NOS) e foi observado que a potencia relaxante foi diminuida cerca de seis vezes (CE50 = 35,6 ± 6,2 μg/mL) quando comparada ao controle, sendo essa reducao parcialmente revertida na presenca concomitante de L-NAME e L-arginina (CE50 = 26,6 ± 1,3 μg/mL), substrato para a NOS, confirmando o envolvimento da via do NO no efeito tocolitico do ZB-EtOHPA (CE50 = 26,4 ± 3,8 μg/mL). O proximo passo da via do NO a ser investigado foi a participacao da ciclase de guanilil soluvel (sCG) e da proteina cinade G (PKG). Com isso, foi observado que a potencia tocolitica do extrato foi reduzida cerca de 5 e 3 vezes na presenca do ODQ, um inibidor da sCG (CE50 = 36,9 ± 7,3 µg/mL) e do Rp-8-Br-PET-cGMPS, um inibidor da PKG (CE50 = 15,4 ± 2,7 µg/mL), respectivamente, confirmando a modulacao positiva da via do NO/sCG/PKG no seu efeito tocolitico em rata. Compreendendo que essa via pode modular os canais de K+, resolveu-se investigar a participacao destes canais no efeito tocolitico do extrato na presenca de cloreto de cesio (CsCl), bloqueador nao seletivo de canais de K+ e foi observado um desvio para direita da curva concentracao‑resposta do extrato com reducao da potencia relaxante (CE50 = 15,44 ± 2,69 μg/mL), o que confirma a participacao dos canais de K+ no efeito tocolitico do ZB-EtOHPA. Para verificar os subtipos de canais utilizou‑se bloqueadores seletivos. A curva controle concentracao‑resposta tambem foi desviada para a direita e a potencia tocolitica reduzida na presenca de tetraetilamonio, bloqueador de BKCa (CE50 = 16,8 ± 2,8 μg/mL), de apamina, bloqueador de SKCa (CE50 = 22,0 ± 3,3 μg/mL), glibenclamida, bloqueador de KATP (CE50 = 28,2 ± 5,3 μg/mL) e de 4‑aminopiridina, bloqueador de Kv (CE50 = 73,2 ± 13,4 μg/mL). Por fim, o ZB-EtOHPA teve sua potencia tocolitica reduzida quando esses quatro bloqueadores foram pre‑incubados simultaneamente (CE50%= 31,3 ± 6,0 μg/mL), entretanto, nao foi identificado efeito sinergico entre eles. Tambem foi avaliado o efeito tocolitico de dois flavonoides isolados do ZB-EtOHPA, 7‑metoxiflavona (7-MF) e 5,7-dimetoxiflavona (5,7-DMF),e observou-se que ambos apresentaram efeito tocolitico, sendo a 7-MF equipotente frente a OCI (CI50 = 3,2 ± 0,9 x 10-5 M) e ao CCh (CI50 = 4,3 ± 0,4 x 10-5 M) e, diferentemente, o 5,7-DMF apresentou potencia cerca de 2 vezes maior frente ao CCh (CI50 = 1,7 ± 0,3 x 10-5 M) quando comparada a OCI (CI50 =4,2 ± 1,0 x 10-5 M).Dessa forma, o mecanismo de acao tocolitica proposto para o ZB-EtOHPA em rata pode ter envolvimento da modulacao positiva na via NO/sGC/PKG e canais de K+, apontando o bloqueio dos Cav-1 e, consequentemente, diminuicao do influxo de Ca2+, promovendo relaxamento do musculo liso uterino. Alem disso, os flavonoides, 7-MF e 5,7-DMF, provavelmente sao os responsaveis pelo efeito tocolitico do extrato.
MEMBROS DA BANCA:
Externo à Instituição - ANA CAROLINA DE CARVALHO CORREIA
Presidente - 2337274 - FABIANA DE ANDRADE CAVALCANTE OLIVEIRA
Interno - 1174357 - ISAC ALMEIDA DE MEDEIROS